O exame PGD (Diagnóstico Genético Pré-implantacional) auxilia na análise genética dos embriões. A principal causa de perda embrionária em Reprodução Humana e em Fertilização in vitro é a alta incidência de anormalidades cromossômicas que se originam de problemas de disjunção cromossômica (alterações genéticas na quantidade dos cromossomos) no óvulo ou no embrião. Tais anormalidades têm maior incidência com o aumento da idade da mulher.
O diagnóstico genético pré-implantacional permite a análise genética dos embriões antes de sua transferência para a cavidade uterina. A técnica consiste na retirada com micropipeta de um ou mais blastômeros (células do embrião), sem comprometimento do desenvolvimento do embrião. A constituição cromossômica destes blastômeros pode ser analisada por hibridização fluorescente in situ (FISH-Fluorescent In Situ Hybridization) ou por reação em cadeia de polimerase (PCR-Polymerase Chain Reaction). A identificação de aneuploidias pode auxiliar na identificação dos embriões com melhor capacidade de implantação e de desenvolvimento normal.
O FISH é realizado quando se deseja pesquisar aneuploidias (caso de pacientes após os 40 anos) e o PCR quando se procura alguma alteração ao nível dos genes, como doenças de transmissão genética, as quais são citadas a seguir.
O diagnóstico genético pré-implantacional auxilia também na identificação da mutações dominantes e recessivas que ocasionam doenças genéticas graves. A opção de se fazer o diagnóstico antes da transferência dos embriões para o útero dá ao casal com alto risco genético a possibilidade de não ter de enfrentar uma interrupção voluntária da gravidez, única escolha no diagnóstico genético pré-natal.
As estruturas biopsiadas para o diagnóstico genético no período de pré-implantação podem ser:
A biópsia do corpúsculo polar (estrutura que contém o material nuclear do embrião) não afeta a fertilização e a viabilidade dos embriões resultantes assim como seu desenvolvimento após a implantação. Verlinsky e Cols¹ analisaram diagnóstico genético através do corpúsculo polar em 700 ciclos de Fertilização Assistida para diagnóstico pré-implantacional para casos de fibrose cística, deficiência da a-1-antitripsina, retinite pigmentosa, hemofilia A e B, talassemia, Alport, Doença de Gaucher, Tay Sachs, anemia falciforme e anormalidades cromossômicas. Mais de 4.000 óvulos foram testados. Houve transferência embrionária em 75% dos ciclos resultando em uma taxa de gravidez de 23%. Mais de 90 crianças não afetadas nasceram, confirmando o resultado do diagnóstico da biópsia do corpúsculo polar.
Após a Fertilização In Vitro os embriões podem ser biopsiados durante vários estágios de clivagem (fragmentação) e os blastômeros retirados, preparados para análise genética. No início da década de 90 o diagnóstico genético pré-implantacional era utilizado para casais com risco de ter crianças com doenças ligadas ao cromossomo X. Atualmente a hibridização Fluorescente In Situ com combinações de sondas para cromossomos autossômicos e sexuais é utilizada para diagnóstico de aneuploidias, podendo também ser utilizado para determinação do sexo. A reação em cadeia da polimerase (PCR) é utilizada geralmente para diagnosticar defeitos gênicos específicos. A estatística mundial dos casos de diagnóstico genético pré- implantacional mostra taxas de gravidez de aproximadamente 26% por transferência embrionária².
A biópsia de blastocistos está se tornando bem mais acessível devido aos avanços nos sistemas de cultura que permitem atingir mais facilmente o estágio de blastocisto 3.
A biópsia do embrião no estágio de blastocisto permite a retirada de uma quantidade de células relativamente grande. O DNA (material genético) destes blastocistos pode ser analisado e várias mutações podem ser detectadas por técnicas de PCR (Reação em Cadeia de Polimerase).
alto grau de viabilidade devido à seleção natural dos embriões,
biópsia realizada somente no trofodermo (local que irá formar a placenta) com mínima lesão da massa celular (local de formação do embrião),
número bem maior de células disponíveis para análise genética.
dificuldade técnica de se retirar células que estão aderidas umas às outras,
necessidade de se manter os embriões em cultura por mais 2 ou 3 dias. A experiência com biópsia de blastocistos ainda é inicial e não se dispõe de dados clínicos suficientes para se tirar conclusões consistentes.
©2024 Todos os direitos reservados Clínica Dra. Silvana Chedid
